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EM Cryo CLEM是我们低温工作流程中的关键要素。对我来说,它已经变得不可或缺。

博士海德堡欧洲分子生物学实验室(EMBL)的组长兼电子显微镜核心设施负责人Yannick Schwab

没有THUNDER成像器的HeLa细胞
带THUNDER Imager的HeLa细胞

使用THUNDER,您可以更好地识别并映射感兴趣的区域

为了使细胞结构最佳可视化,THUNDER Imager EM Cryo CLEM将高分辨率的冷冻镜头与Leica Microsystems的THUNDER技术结合在一起。结果是清晰锐利,完全清晰的图像。

使用创新的Leica计算清除方法来消除广角观察中可能出现的模糊模糊。 雷 Imager EM Cryo CLEM还包括一个50 x / 0.9 NA的物镜。与工作距离大的常用镜片形成对比 该镜头专门为玻璃化样品的高分辨率成像而开发。您将受益于更好地识别和可视化细胞结构的细微细节,以及广角显微镜的速度和易用性。

互动图片: HeLa细胞应用于涂有Gold-Quantifoil R2 / 2的G200F1搜索网格。
用GFP-TGN46(反式-高尔基网络)和mCherry-Lifeact(F-肌动蛋白)转染细胞。核心用Hoechst 33342染色。  伦敦弗朗西斯·克里克学院的露西·科林森(Lucy Collinson)提供。

简单,可重复的工作流程

如果您需要在电子显微镜中快速找到感兴趣的区域,则可以简单地对其进行标记并在样品转移过程中导出坐标。直观的软件将指导您完成工作流程,以便您快速有效地获得成功完成EM考试所需的结果。然后使用THUNDER处理图像以获取高分辨率的详细结果。

您的优势:

  • 简单,精确的瞄准和数据收集-该软件可指导您逐步完成成像工作流程
  • 轻松成像-只需标记感兴趣的区域,该软件将自动捕获马赛克图像并将它们精确地缝合在一起
  • 使用THUNDER进行后处理以获得高分辨率的详细图像
  • 快速,可重复的结果-您可以保存并调用完整的实验设置
雷 Imager EM Cryo CLEM
EM网格上的细胞荧光图像,可视化并使用EM Cryo CLEM进行选择性标记。
可以看到完全相同的单元格,并使用坐标标记(在Thermo Scientific Aquilos上)调出。

使用冷光显微镜可轻松进行坐标转换检索

雷 Imager EM Cryo CLEM的集成软件不仅可以指导您完成成像工作流程,而且只需单击一下即可导出原始图像数据和关联的坐标。您可以在您喜欢的电子显微镜中立即找到目标细胞区域,然后开始研究样品的超微结构。

如果您使用Thermo Fisher Scientific的MAPS EM,也可以使用我们共同开发的 低温电子断层扫描的受益工作流程 。该工作流程可确保从玻璃化与我们的EM GP2到玻璃与3D图像重建(通过Thermo Scientific Krios™G3i-Cryo-TEM)完全集成。 

互动图片: 选择和检索坐标。 EM网格上的细胞荧光图像,可视化并选择性标记。可以在Thermo Scientific Aquilos上使用坐标标记查看和定位完全相同的单元格。

保持低温条件 

为了最大程度地获得成功测试结果的可能性,独特的试剂盒系统和封闭的低温台确保您的样品保持玻璃化。该系统在装载和转移过程中,甚至在长期成像过程中,将污染的可能性降至最低。

这个怎么运作

药筒系统(1)可以安全,快速地处理制剂。压力和夹紧机构可确保更高的样品通量,并加快将网板装载到冷冻台中的速度。

穿梭扩展坞(2)通过保持最佳温度来保护您的低温样品。 

带有同步镜头盖的冷冻台(3)通过将制剂保持在稳定的超压下来防止制剂被空气污染

使用传送梭将网络板盒插入EM Cryo CLEM

选择适合您的生物学研究的工作流程

雷 Imager EM Cryo CLEM是一种灵活的多功能解决方案,可以在各种电子显微镜工作流程中实施。

选择与您的生物学研究问题相关的实验的最佳工作流程,以便获得所需的答案。有关我们生命科学研究工作流解决方案的更多信息 下载我们的工作流程手册.

低温CLEM工作流程

通过此工作流程,您可以分析冷冻样品的高分辨率超微结构。高压冷冻并进行样品冷冻切片。然后THUNDER Imager EM Cryo CLEM将帮助您在冷冻TEM成像之前确定您感兴趣的区域。该工作流程适用于组织样本。 

(1)高压冷冻(EM ICE)
(2)冷冻切片(EM UC7 / EM FC7)
(3)确定感兴趣的区域(THUNDER Imager EM Cryo CLEM)
(4)在TEM中成像

低温网格上的层状工作流程-使用Thermo Fisher Aquilos的Cryo FIB-SEM

分析其天然细胞环境中的蛋白质结构。将样品浸入冷冻并研磨感兴趣的区域以在冷冻TEM中成像。 

(1)柱塞冷冻(EM GP2)
(2)确定感兴趣的领域(THUNDER Imager EM Cryo CLEM)
(3)使用Thermo Fisher Aquilos Cryo FIB SEM进行研磨和涂层
(4)在TEM中成像

低温网格上的层状工作流程-使用Thermo Fisher Aquilos的Cryo FIB-SEM

低温并网薄板工作流程 - 适用于所有其他FIB-SEM制造商

分析其天然细胞环境中的蛋白质结构。将样品浸入冷冻并研磨感兴趣的区域以在冷冻TEM中成像。 

(1)柱塞冷冻(EM GP2)
(2)确定感兴趣的领域(THUNDER Imager EM Cryo CLEM)
(3)传输(EM VCM)
(4)涂层(EM ACE600 / EM ACE900)
(5)变速箱(EM VCT500)
(6)FIB中的铣削
(7)在TEM中成像 
 

Cryo网格薄板工作流程-适用于所有FIB-SEM制造商,Thermo Fisher Aquilos Cryo-FIB SEM除外

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