在线联系我们

追踪分子与FLIM-FRET的相互作用

现代研究调查了分子如何相互作用以完成重要任务。 电影 -FRET是探索这些相互作用的黄金标准。

恒星8 FALCON sets a new speed standard for 电影 instruments.

它在高度动态的细胞事件中启用FRET。您可以在日常实验中获取和解释FRET数据。

表达EPAC mT2-dVenus FRET传感器的HeLa细胞中的笼状cAMP。 EPAC对紫外线介导的cAMP解封的响应(中心区域)。动画以4 fps录制。图片尺寸:256 x256像素。彩条标度(生命周期):ns。由NKI阿姆斯特丹的Kees Jalink提供,Bram van den Broek。

凝血酶活化肽刺激后钙振荡。单个电池中的响应记录为寿命变化。以4 pfs拍摄的电影。图片尺寸:256 x 256像素。彩条标度(生命周期):ns。图片由Kes Jalink提供,NKI阿姆斯特丹的Bram van den Broek。

使用生物传感器监控细微而快速的变化

生物传感器是代谢活动,信号传导机制,pH和微环境变化的有力报告者。

恒星8 FALCON甚至在超快事件(例如膜电位动态变化)中,也可以访问荧光寿命中包含的信息。该信息是对光谱荧光强度成像和TauSense模式所提供的补充。 恒星8 system.

更可靠,更敏感的代谢成像

自发荧光可以 传统成像中的一个问题。 STELLARIS 8 FALCON将其转化为有价值的信息。 现在,您可以将自体荧光转变为用于代谢状态,细胞分化和癌症发展的报告基因。

Moreover, 恒星8 FALCON可以在活体组织中进行成像对比,在活体组织中,荧光标记通常是非特异性的或破坏生理状况。

非生理条件(pH 8.5)下哺乳动物细胞中的自发荧光。该信号与NAD / NADH内源库的变化相关。氧化应激的发展表明荧光寿命随着时间的推移而降低。原始图片尺寸:512 x 512像素。彩条标度(生命周期):ns。
强度
电影

荧光团分离超出光谱选择范围

荧光标记是区分细胞内结构的标准方法。光谱分离非常强大,但有时在发射光谱太近时会受到限制。

用 恒星8 FALCON, you can exploit the full potential of fluorescence lifetime imaging to separate multiple fluorescent probes using exponential fitting, pattern fitting and the new 电影 phasor separation analysis.

交互式图像:通过生命周期对比而区分的细胞骨架结构。波形蛋白用Alexa Fluor 555免疫标记(绿色),微管蛋白用Alexa Fluor 546免疫标记(蓝色)。荧光团在光谱上非常相似,但是使用荧光寿命信息将它们分开。图片尺寸:512 x 512像素。

恒星8 FALCON for fast lifetime imaging

The 恒星8 FALCON microscope overcomes the speed limitation of 电影 and opens the door to fast lifetime data.

到目前为止,由于FLIM的技术限制,很难从快速过程的荧光寿命数据中提取功能信息。 电影 的采集速度比记录共焦强度至少慢10倍。

使用STELLARIS 8 FALCON快速寿命对比成像,您可以以适当的速度跟踪细胞中的动态过程。由于采用了TCSPC(与时间相关的单光子计数)以及用于数据处理和分析的智能算法来测量时间的新方法,这些任务成为可能。

《自然》中的应用说明: SP8 FALCON:荧光寿命成像的新概念,可实现视频速率共聚焦FLIM

包含Alexa Fluor 555(绿色)的溶液中荧光珠(品红色)的单通道图像。基于荧光寿命的荧光团分离可以在各种速度下进行,例如16 fps(最高),27 fps(视频速率,中)和83 fps(超快,最低)。使用寿命信息进行染料分离比强度(灰度)要有利得多。电影显示了寿命组件的逐像素拟合。画面尺寸:512 x 64像素。比例尺:10 µm。

直接获取复杂的样本。包含190兆像素的722个图块的高分辨率鼠标胚胎马赛克图像。 电影 数据具有四个特征荧光寿命,用颜色编码。采集:1:23小时。分析:1:00小时

多合一多模态成像

将FLIM与其他方式组合起来从来没有像STELLARIS 8 FALCON那样容易。迄今为止,研究人员不得不应对复杂的接线和繁琐的文件传输任务。使用STELLARIS 8 FALCON,您可以将生命周期信息集成到标准共聚焦工作流程中。

恒星8 FALCON已完全集成在LAS X采集和分析软件中。它可以同时在四个频谱通道中记录FLIM,并依次记录多达10个通道。 恒星8 FALCON使您可以访问3D堆栈,延时序列甚至大型马赛克平铺格式中的寿命对比。

用 LAS X NAVIGATOR,您可以将查看区域扩大到10,000倍,从而节省了宝贵的时间来识别您感兴趣的区域并以全新的方式浏览样品。

用相量的简单寿命定义

分析用 恒星8 使用FLIM相量的FALCON provides a 2D visualization of lifetime components. 用 电影 phasors you can follow microenvironmental changes, select components to multiplex signal and determine FRET efficiency.

用Alexa555-鬼笔环肽和H2B mCherry标记的细胞。使用FLIM相量执行分离。相量图清楚地显示了两种分布。礼貌:德国康斯坦茨大学生物学系MartinStöckl博士。 
1-click philosophy to focus on your science: 恒星8 FALCON controlled by the LAS X software

一键获得您需要的结果

LAS X软件可通过点击和与常规光谱成像相同的原理实现FLIM。

即使您使用显微镜作为辅助技术,也可以找到要点并立即开始成像。

可以将更多专门功能作为工作流进行访问,并为您的方便实现自动化。

有兴趣了解更多吗?

与我们的专家交谈。 我们很高兴回答您的所有问题。

联系我们

您喜欢个人咨询吗?

  • 徕卡微系统公司
    利德巷1700号
    布法罗格罗夫, IL 60089 美国
    办公室电话 : +1 800248 0123
    服务电话 : 1800248 0223
    传真 : +1 847-236-3009
  • 徕卡微系统公司
    利德巷1700号
    布法罗格罗夫, IL 60089 美国
    办公室电话 : +1 800248 0123
    服务电话 : 1800248 0223
    传真 : +1 847-236-3009

您可以在此处找到本地联系人的更详细列表。