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为您的研究增加多功能性

使用DLS对STELLARIS 5或STELLARIS 8系统进行补充,可使您的研究更加灵活,使您能够通过简单的样品处理和多位置实验轻松地在三维上对不同类型的样品进行成像。

DLS模块旨在改善您的活细胞成像应用,通过单平面照明和使用sCMOS相机的快速成像来提高细胞活力。除了活体标本,DLS还允许对清除的样品进行成像,从而提供更大的灵活性来实现您的研究目标。

垂直转弯–如何将光片带到共聚焦上?

光片显微镜通常需要在独立系统上进行专门的光学设置,其中照明和检测物镜相互垂直。 DLS使光片显微镜易于使用。独特的TwinFlect反射镜设备以90°角偏转照明光。这种改进允许将照明和检测光束路径集成到每个带有倒置显微镜支架的STELLARIS系统的垂直轴中。所有这些增强功能都不会影响共焦功能。

低光毒性和3D标本成像:果蝇在六个小时内发育。探针:光敏RFP。 3D渲染。 150 µm z堆栈,每秒钟30秒。

进行并记录长期观察

成像需要光线,但是光线过多会损坏细胞。光学薄片显微镜是迄今为止最柔和的成像方法,因为它减少了光毒性和漂白引起的总体光损伤。这会自动增加样品的活力。薄板成像特别有利于发育生物学。弱光照明和高速采集的结合,使您可以长时间跟踪像果蝇胚胎这样的敏感,发育中的生物,并了解组织和器官如何实时和3D形成。

光片成像原理

通过仅在单个平面上照射标本,光片显微镜是一种非常适合的方法,可对敏感样品或快速的生物过程进行成像。

因为没有散焦激发,所以可以将光毒效应减少到焦平面。此外,通过将样品移过光片,您将自动进行光学切片,并可以以3D方式对样品成像。

高速成像:斑马鱼心脏跳动,转基因系fl ik1 :: EGFP。 xytz记录后的采集后高度。记录速度:120帧/秒。图片由法国斯特拉斯堡IGBMC Vermot实验室的Emily Steed提供。

具有出色分辨率的快速图像采集

如果没有正确的图像速度和分辨率,则长时间观察3D的快速周期性生物过程(例如斑马鱼心脏跳动)可能会很困难。借助DLS模块,您可以在两台最先进的sCMOS相机之间进行选择,以实现具有出色分辨率的快速图像采集,它们均已完全集成到LAS X LightSheet向导中。

7.5小时延时记录以3D模式培养的乳腺上皮微球体。数据由BioQuant / DKFZ Heidelberg的智能成像小组(B. Eismann / C。Conrad)提供

探索3D细胞培养,一次多个位置

3D细胞培养物(例如类器官或类球体)的有效成像由于体积大而带来了新的挑战。可以使用清除技术对类器官进行固定,免疫标记和研究,还可以通过活体方法研究动态过程。借助已定义的工作流程,使用DLS研究这些样品非常简单,并提供有关细胞和分子过程的有意义的信息。 DLS非常适合满足清除和现场制剂的需求,使您受益于研究3D细胞培养,与在贴壁细胞上进行2D细胞培养相比,这些条件与生理相关性更高。

发现完整的 3D细胞生物学工作流程 数字LightSheet显微镜。

用于活体和清除样品的光片系统

由于生物组织的不透明性,难以进行深层组织显微镜检查。这是越来越多的组织清除协议发挥作用的地方,但是它们对于许多成像系统而言可能是一个挑战。

DLS模块不仅可以为实时样本提供出色的结果,而且还可以对经过各种不同清除技术的样本进行成像。使用DLS,您可以在多个检测目标和安装框架之间进行选择,以可视化已清除组织和生物体内的结构细节。

视频采集条件

  • 检测对象HC APO L10x / 0.30 W DLS
  • 图像尺寸:1.39mm x 2.04mm(2x3拼贴)
  • Z叠层:1.5mm厚度(2um步长,745帧)
  • 采集时间:5分37秒
  • 激发波长:514nm
  • 发射:LP514nm长通,曝光时间6毫秒

用SeeDB2G清除成年Thy1-YFP-H小鼠脑片的大脑皮质和海马区。图片由日本神户理研中心的Meng-Tsen Ke博士和今井武史博士提供。

此示例演示了共聚焦与DLS结合的优势。标记转基因的斑马鱼胚胎以可视化参与免疫反应的巨噬细胞。为了调查他们在受伤时的行为,使用共聚焦激光创建伤口(箭头),然后录制了延时电影。视频显示了活化细胞的动态反应,这些细胞现在正在迁移到伤口,从而触发愈合过程。对于这种情况,切换到DLS可以对斑马鱼进行温和的活细胞成像。 

受益于许多其他应用

我们的光片模块不仅是您的共聚焦功能附件。 斯特拉里斯和DLS协同合作,为您的研究提供更多选择。例如,您可以使用共聚焦技术处理标本,然后使用DLS成像。

只需在LAS X软件中的共焦和光片模式之间切换即可完成。这样,通过光转换或伤口实验以及随后的长期观察即可轻松实现。

熟悉的样品制备

由于DLS的垂直实验设置,您可以保持熟悉的样品制备。标本安装在常规的玻璃底培养皿中,可直接取用。您甚至可以在多位置实验中筛选多个样品。利用共聚焦载物台自动化,可以在一个实验装置中对多个标本成像。唯一的先决条件是什么?样品两侧的TwinFlect反射镜有一些空间。

DLS的样品制备。将标本包埋在玻璃底培养皿中的琼脂中。必须除去过多的琼脂,才能为TwinFlect镜子腾出空间。

其他样品处理工具

使用U形玻璃毛细管进行样品安装

U型玻璃毛细管有两种不同的尺寸。这样,它们可以与不同的TwinFlect反射镜配合使用,并且可以用作放置样品的最佳支架。 
附加信息

使用旋转装置安装DLS样品

FEP管的折射率为1,338,通常用于安装浸入水溶液中的样品。为了最佳地对准要成像的样品,已经设计了旋转装置来调节视角。
附加信息

使用安装架进行样品制备

此处显示的Leica安装架为进行DLS成像所需的样品制备提供了一个主要好处:它们可以制备更多的样品。它们可以与潜在有害的试剂(如BABB(苄醇苯甲酸酯)一起使用)。
附加信息

安装框架套件(样品架矩形24 x 50 mm +样品架圆形,直径30 mm)

具有共聚焦优势的薄板

由于DLS的无缝集成,STELLARIS系统的技术创新可为您的光片成像带来好处。 

永远是正确的激光

您可以将STELLARIS共焦的所有可见光激光器用于光片成像。可选的二极管激光线以及STELLARIS下一代白光激光器可以为您的光片实验选择合适的染料提供高度的灵活性。借助STELLARIS 8,您现在甚至可以解锁近红外染料的成像。

永远是正确的扫描仪

在配备有 串联扫描仪,您可以选择 在共振扫描仪或 视场扫描仪(在1400Hz下)以生成扫描的光片。使用谐振扫描仪生成光片会产生更短的像素停留时间,这对执行更柔和的成像很有帮助。

面向工作流程的软件设计

LAS X软件可指导用户逐步进行数据记录和评估。面向工作流程的设计可帮助您更有效地使用仪器。方便的校准程序可以精确地建立光片。

样品的双面照明是设计使然的:TwinFlect的两个相对的镜子中的每一个都可以被扫描仪对准,以克服较暗的区域。对于大视野的清晰图像,可以使用LAS X软件中LightSheet向导的联机或在线融合选项合并两个图像。

通过其他软件包来定制LAS X,以满足您的需求。 LAS X 3D可视化模块通过直观的剪辑,快速渲染和立体显示提供了新颖的方式来与3D数据进行交互。平铺扫描实验使您可以观察大面积。标记&查找实验使您可以在多位置设置中观察多个感兴趣的区域。

卓越的光学

广泛应用的卓越目标是 徕卡显微系统的标志之一。我们的心 垂直转动光片的系统由 物镜和TwinFlect反射镜设备。

通过选择不同的照明物镜,您可以根据实验要求对光片进行整形。

In 为了揭示最详细的信息, 查看或适应成像介质的折射率,您可以从越来越多的选项中选择最佳检测目标。

目的 活细胞成像 糖基清洁剂 BAAB结算兼容
FLUOTAR L 25x / 0.95瓦  没有 没有
APO长20x / 0.5 W 没有 没有
Fluotar L 16x / 0.6 IMM
APO L 10x / 0.3 没有
5x / 0.15 IMM

方便的数据处理

长时间观察3D过程会产生大量数据。 LAS X软件中实现的多种工具可帮助您方便地管理数据。在线融合工具使您可以选择保留原始数据或 通过仅保存合并的图像来获得光盘空间。您的数据将在采集过程中自动存储。智能加载可简化数据查看,使您可以直接访问大型延时数据集中的时间点或感兴趣的z堆栈。您可以在自动处理的管道中编译所需的后处理步骤。

最佳环境条件

软件控制的气候箱可保持您的标本最喜欢的环境条件。用户可以使用LAS X环境控制模块完全控制实验条件。实验期间可以监视记录的环境数据。可以在一个界面中设置所有环境条件,因此,例如,您可以运行温度曲线以进行热冲击实验。

在环境箱或台式培养箱中选择。

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