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用于制备Microct分析的生物样品的关键点干燥

X射线微计算断层扫描(Micro-CT)是一种常规应用的非侵入性技术,用于调查生物体的内部解剖和形态。由于微CT扫描,从在样本旋转期间从定义角度拍摄的一系列突起产生一堆灰度图像。由于几年来,实验室的微型CT成像系统的数量不断增长,使该技术可用于广泛的研究人员和应用。

类似于其他成像技术,例如扫描电子显微镜,微型CT允许在几乎每种条件下研究生物样品(例如,新鲜,干燥或防腐剂)。 Micro-CT是研究骨骼,牙齿和壳体3D的理想技术,但基于具有低原子数元素的化合物的存在,软组织的分析受到其低吸收对比度的影响和阻碍。为了克服这种限制,可以应用包括不同的染色和/或干燥技术以及相位相关的对比度成像。然而,只要在干燥的条件下分析可能的样品,与液体扫描的样品相比,它提供明显更高的信噪比。为了干燥精致的生物样品, 临界点干燥 与例如,化学或空气干燥相比,被证明是最好的方法,因为它保留了结构,同时最小化组织和变形的诸如收缩的伪影。

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书蝎子肌肉组织的微型计算机断层扫描协议

介绍

物种:书蝎子(Neobisium sp。)

随后X射线微型计算机断层扫描(Micro-CT)的临界点干燥与随后的X射线微型计算断层扫描(Micro-CT)检测具有特殊考虑肌肉组织的解剖功能。

程序

样品保持器:将样品转移到微孔标本罐中,并置于过滤盘和多孔罐支架中。

固定和脱水

  • 乙醇(70%):过夜
  • 乙醇系列(80 %, 90 %, 96 %, 100 %): 2 × 10 min.
  • 碘染色(1 100%碘溶液 %乙醇):过夜
  • 乙醇(100. %): 2 × 10 min.

CPD300汽车程序

安装和扫描

将干燥的样品粘在昆虫销上并用Xradia Microxct-200 X射线成像系统(Carl Zeiss X-Ray Microscopy Inc.,Pleasanton,USA)扫描。


昆虫脑的微观计算机断层扫描协议

介绍

物种:吹蝇(Lucilia caesar)

用随后的X射线微型计算机断层扫描(Micro-CT)爆炸吹的临界点干燥以检测神经杀菌特征。

程序

样品架:样品在节肢动物支架的腔室中单独放置。

固定和脱水

  • Bouin的固定剂:过夜
  • 0.1M磷酸盐缓冲液(1.8 %蔗糖,pH7.2):3×10分钟。
  • 乙醇系列(60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 96 %, 100 %): 2 × 10 min.
  • 碘染色(1 100%碘溶液 %乙醇):过夜
  • 乙醇(100. %): 2 × 10 min.

CPD300汽车程序

安装和扫描

将干燥的样品粘在昆虫引脚上,并用XRADIA Microxct-200 X射线成像系统(Carl Zeiss X-Ray Microscopy Inc.,Pleasanton,USA)扫描。


昆虫幼虫的微观计算机断层扫描协议

介绍

物种:红血蠕虫(Midge Larva)

Midge Larvae的临界点干燥与随后的X射线微计算断层扫描(Micro-CT)重建内部解剖学。

程序

样品保持器:样品在节肢动物支架的腔室中单独放置。

固定和脱水

  • 2.5 %糖醛醛(0.1 M磷酸盐缓冲液):过夜
  • 0.1M磷酸盐缓冲液(1.8 %蔗糖,pH7.2):3×10分钟。
  • 乙醇系列(60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 96 %, 100 %): 2 × 10 min.
  • 碘染色(1 100%碘溶液 %乙醇):过夜
  • 乙醇(100. %): 2 × 10 min.

CPD300汽车程序

安装和扫描

将干燥的样品粘在昆虫销上并用Xradia Microxct-200 X射线成像系统(Carl Zeiss X-Ray Microscopy Inc.,Pleasanton,USA)扫描。  

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