在线联系我们
抽象

使用超高分辨率和常规成像技术对不同类型的亨德拉病毒感染的详细形态学表征

背景
亨德拉病毒(HeV)是属于副粘病毒家族的多形病毒。我们的长期目标是了解戊型肝炎病毒颗粒的组装过程。第一步,我们寻求确定最合适的细胞培养系统来研究该过程,然后使用该模型定义病毒的形态,并通过对感染细胞中病毒编码的关键蛋白进行成像来确定装配位点。

方法
用HeV感染一系列原代细胞和永生细胞系,在感染后的各个时间点固定,标记HeV蛋白,并通过共聚焦,超分辨率和透射电子显微镜成像。

结果
根据感染的细胞类型,在病毒蛋白分布中注意到了显着差异。在8点 hpi HeV 在所有测试的细胞中,在内质网中检测到G蛋白,而在细胞核中则主要观察到M蛋白。 18岁 hpi,感染HeV的Vero细胞在整个细胞内和透射电子显微镜下均显示M和G蛋白(透射电镜)部分,呈多形病毒样结构。在HeV感染的MDBK,A549和HeLa细胞中,HeV M蛋白主要见于细胞核,膜上有G蛋白。在被HeV感染的牛和猪主动脉内皮细胞和两个蝙蝠来源的细胞系中,在任何测试时间点的细胞核中均未见如此高水平的HeV M蛋白(8、12、18、24、48 hpi),但主要在细胞表面以与G蛋白共定位的点状模式观察到。这些混合动力车 M和G阳性结构被确认为圆形HeV病毒体 透射电镜 和超分辨率(SR)显微镜。 SR成像首次证明副粘病毒蛋白的亚病毒体成像以及HeV的各自定位 病毒体中的G,M和N蛋白。

结论
这些发现为HeV的结构提供了新颖的见解,并表明对于HeV成像研究,组织培养细胞的选择可能会影响实验结果。结果还表明,应将HeV视为主要是圆形病毒,平均直径约为280 nm by 透射电镜 和310 nm by SR imaging.

主题 & 标签

阅读全文:

Monaghan P,Green D,Pallister J,Klein R,White J,Williams C,McMillan P,Tilley L,Lampe M,Hawes P和Wang L-F:
使用超高分辨率和常规成像技术对不同类型的亨德拉病毒感染的详细形态学表征

病毒学杂志11(1):200(2014); doi:10.1186 / s12985-014-0200-5