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保拉如何帮助简化伤口愈合检测的工作流程?

伤口愈合试验的应用

伤口愈合测定法通常用作刮擦测定法或迁移测定法的同义词,是评估和测量江苏体彩迁移(无论是单江苏体彩还是江苏体彩群体)的重要工具。在个体发生过程中,江苏体彩迁移受到严格控制,有时可能失控,例如在癌症发展和进程中。

有关江苏体彩迁移的重要问题是:

  • 特定药物如何改变我江苏体彩的迁移速率?
  • 在某些条件下,我的江苏体彩迁移有多快?

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伤口愈合实验

进行伤口愈合实验的基本过程非常简单。在100%融合的江苏体彩单层中会产生人为的无江苏体彩间隙,并监测江苏体彩关闭该间隙的能力。

为了获得可靠和可重复的结果,需要考虑和标准化许多参数。以下各节将涵盖有关监视单元的一些常规方面,并演示PAULA如何帮助简化工作流程任务。

由HeLa江苏体彩组成的伤口愈合试验的视频。

合适的对比方法

在标准的明场显微镜设置中,大多数江苏体彩单层相对难以检测甚至"invisible"。通过相衬,江苏体彩“形状”被突出显示,从而使江苏体彩易于检测。然而,使用相衬的手动显微镜的设置可能是麻烦且耗时的,特别是对于未经培训的用户。通常,荧光可用于监测其他迁移因素。但是,不应将其用作标准的对比方法,因为光漂白和光毒性会显着改变迁移。

  • 保拉提供不需要校准的无对准相位对比。
  • 只需单击一下即可激活相衬。
  • 荧光对比(红色和绿色发射,例如 绿色荧光蛋白 和dsRed标记的单元格)可以添加(如果需要)。

具有100%融合江苏体彩层的伤口愈合测定

找到正确的时间点很重要。在大多数情况下,伤口愈合分析是使用100%融合江苏体彩层进行的。一旦江苏体彩达到100%汇合,保持江苏体彩生长就可以诱导江苏体彩脱离,甚至抑制邻近江苏体彩。因此,找到正确的时间点开始伤口愈合测定对于进行成功的实验并产生有意义的结果至关重要。

  • 当您的江苏体彩达到所需的融合度时,PAULA会通过电子邮件通知您。
  • 您不再需要去江苏体彩培养实验室并手动检查江苏体彩。
  • 您可以找到开始伤口愈合实验的最佳时机。

最佳环境条件至关重要

伤口愈合试验通常使用所谓的“死角”分析进行。必须从培养箱中取出江苏体彩瓶,并手动检查江苏体彩,以确定何时完全关闭间隙。这种方法很耗时,而且不是很准确。或者,可以将江苏体彩瓶保存在配备有气候室的显微镜平台上。原则上,这可以正常工作,但是温度和一氧化碳的波动2 无法完全排除。那么,为什么不将江苏体彩保持在最可能发挥良好作用的地方呢?这意味着在培养箱中,江苏体彩培养应具有最优化的环境条件。

  • 保拉可以放在常规江苏体彩培养箱中,将江苏体彩保持在最佳条件下。
  • 几天来焦点一直稳定-无需重新调整。
  • 保拉获取延时记录并立即计算当前迁移率和缺口闭合百分比,以及达到50%闭合所需的估计时间。
  • 电池状态和结果可以随时随地进行监控。

将PAULA放在常规江苏体彩培养箱中,将江苏体彩保持在最佳条件下。

一致的间隙尺寸很重要

在许多情况下,单层中无江苏体彩的间隙是使用移液器吸头手动创建的。划痕的大小很大程度上取决于施加到单层表面的压力。但是,要获得可再现的结果,一致的划痕尺寸很重要。

  • 使用PAULA的集成标尺确定确切的单元间隙宽度。
  • 更容易找到不同烧瓶之间的可比间隙大小。
  • 保拉也可用于插入物诱导的无江苏体彩间隙,例如来自ibidi的间隙。

可重复性的其他重要参数

除了间隙大小和环境条件外,还有其他因素可能会影响伤口愈合试验的可重复性。例如,技术参数(如图像和采集设置,系统校准)以及标本条件(如江苏体彩的通过数量)。 保拉监视两种类型的参数。

  • 保拉可以记录江苏体彩的通道号。这样,您始终可以知道自己是否真的在比较相似的电池状态(苹果与苹果或橙子)。
  • 调出用于特定样本的所有个人设置,包括参数的微调(例如照明)。
  • 无需额外校准系统。

易于设置伤口愈合分析

如果伤口愈合实验的设置简单且易于重复多次,则结果更有可能具有可重复性。亲自了解使用PAULA进行伤口愈合测定的过程是多么容易和不言自明。成功的伤口愈合实验仅需3个步骤。

  • 定义你的标本
  • 定义延时
  • 定义兴趣区域

使用PAULA Cell Imager轻松设置伤口愈合测定

结果计数

最终,结果才是真正重要的。

  • 保拉提供了随时间变化的间隙闭合值和迁移率的图形显示。
  • 可以任意定义用于间隙和速率计算的时间点,这样就可以消除在划痕边界处濒临死亡的江苏体彩的影响。
  • 首先估计达到间隙闭合50%和100%的时间,然后计算达到的实际值。
  • 所有数据都可以显示在列表中,并导出到Excel文件中。