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激光显微切割（LMD）和花式应用

敏锐地解决个人问题

最近在激光显微切割领域中开辟了新的且影响深远的应用。除常规解剖外，激光显微解剖系统（LMD徕卡显微系统公司（Leica Microsystems）是标记相关结构的出色工具，可对选定区域进行高度特定的激光操作。此激光打标功能可用于以下应用 CLEM，NanoSIMS以及活江苏体彩领域。以下简明概述显示了如何结合使用以下方法来应对此类复杂挑战： LMD.

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CLEM（相关的光学和电子显微镜）和LMD –快速，精确地跟踪标记的结构

江苏体彩生物学中蛋白质和江苏体彩器研究日益复杂，有时需要结合不同的成像方法。的 CLEM 这种方法特别是结合了光学和电子显微镜等技术。关键目的是在电子显微镜水平上显示由光学显微镜获得的图像，即使活江苏体彩中的动态事件与超微结构和3D信息相关联。使用 LMD可以在培养基质的表面上产生参考坐标系，以在样品制备过程中快速，准确地定位标记的细节。图中令人印象深刻地说明了这一过程 1.

图1：参考网格印在江苏体彩培养底物上。 （一种） 激光显微解剖显微镜参考栅格的方案。使用激发滤光片BP在落射荧光显微镜下对图案化的Aclar基质进行成像 545/30 (B), BP 480/40 (C) 和 BP 360/40 （D）。网格荧光比 绿色荧光蛋白 标记蛋白的信号。 （E） 参考网格在明场和扫描电子显微镜下可见 （F）。 （G–I）由于紫水晶的融化，正负图样的印记如扫描所示 电磁 （G）。结果，聚合后，除去培养底物 （H），图案显示为负号和正号，并留下可见的孔 (I) on the first 电磁 部分。 （J） 安装在镀金活江苏体彩载体上的预图案化基材的图片 [1].

NanoSIMS –三维结构

细菌分析是使用NanoSIMS（纳米二次离子质谱仪）结合 LMD 和 原子力显微镜 （原子力显微镜）以空间分辨率获得样品元素和同位素组成的三维图像<50 nm. The LMD 这种方法在这里也被证明是有利的：激光在用于标记感兴趣结构的滤光片表面上产生网格图案（图 2）。此方法用于海洋生物学，例如，分析太平洋中的碳和氮固定 [2， 3] 和波罗的海 [4].  

图2：带有激光显微切割的过滤器标签（LMD）的报告记者催化沉积系统（CARD）-鱼 纳米级二次离子MS（NanoSIMS）在相同的过滤器位置进行分析。小盒子的照片显示了NanoSIMS的图像 13掺有C的江苏体彩（红色）覆盖在CARD-鱼 用于检测古细菌江苏体彩的图像。每个网格的大小约为50 × 50 µm marked by the LMD 系统 [2].

活江苏体彩研究中的LMD –一种方法"故意破坏"

徕卡 LMD 在活江苏体彩领域对江苏体彩结构如中心体，微管和膜的故意机械破坏也特别有用。例如，据称，激光可以对江苏体彩膜进行穿孔，以渗透先前被膜完全阻断的物质。 莫妮卡·戈塔（Monica Gotta）教授 来自日内瓦大学遗传医学与发展系。最重要的是，可以在江苏体彩分裂过程中操纵江苏体彩的纺锤体设备（图 3).   

图3：野生型单江苏体彩胚胎中的有丝分裂纺锤体消融。一种 秀丽隐杆线虫 单江苏体彩胚胎表达 α-微管蛋白融合于 绿色荧光蛋白。有丝分裂纺锤体在激光消融之前（a）和激光消融之后（b）。消融后两个主轴极分开 [5].

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