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激光显微切割(LMD)和花式应用

敏锐地解决个人问题

最近在激光显微切割领域中开辟了新的且影响深远的应用。除常规解剖外,激光显微解剖系统(LMD徕卡显微系统公司(Leica Microsystems)是标记相关结构的出色工具,可对选定区域进行高度特定的激光操作。此激光打标功能可用于以下应用 CLEM,NanoSIMS以及活江苏体彩领域。以下简明概述显示了如何结合使用以下方法来应对此类复杂挑战: LMD.

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CLEM(相关的光学和电子显微镜)和LMD –快速,精确地跟踪标记的结构

江苏体彩生物学中蛋白质和江苏体彩器研究日益复杂,有时需要结合不同的成像方法。的 CLEM 这种方法特别是结合了光学和电子显微镜等技术。关键目的是在电子显微镜水平上显示由光学显微镜获得的图像,即使活江苏体彩中的动态事件与超微结构和3D信息相关联。使用 LMD可以在培养基质的表面上产生参考坐标系,以在样品制备过程中快速,准确地定位标记的细节。图中令人印象深刻地说明了这一过程 1.

图1:参考网格印在江苏体彩培养底物上。 (一种) 激光显微解剖显微镜参考栅格的方案。使用激发滤光片BP在落射荧光显微镜下对图案化的Aclar基质进行成像 545/30 (B), BP 480/40 (C) 和 BP 360/40 (D)。网格荧光比 绿色荧光蛋白 标记蛋白的信号。 (E) 参考网格在明场和扫描电子显微镜下可见 (F)。 (G–I)由于紫水晶的融化,正负图样的印记如扫描所示 电磁 (G)。结果,聚合后,除去培养底物 (H),图案显示为负号和正号,并留下可见的孔 (I) on the first 电磁 部分。 (J) 安装在镀金活江苏体彩载体上的预图案化基材的图片 [1].

NanoSIMS –三维结构

细菌分析是使用NanoSIMS(纳米二次离子质谱仪)结合 LMD原子力显微镜 (原子力显微镜)以空间分辨率获得样品元素和同位素组成的三维图像<50 nm. The LMD 这种方法在这里也被证明是有利的:激光在用于标记感兴趣结构的滤光片表面上产生网格图案(图 2)。此方法用于海洋生物学,例如,分析太平洋中的碳和氮固定 [2, 3] 和波罗的海 [4].  

图2:带有激光显微切割的过滤器标签(LMD)的报告记者催化沉积系统(CARD)- 纳米级二次离子MS(NanoSIMS)在相同的过滤器位置进行分析。小盒子的照片显示了NanoSIMS的图像 13掺有C的江苏体彩(红色)覆盖在CARD- 用于检测古细菌江苏体彩的图像。每个网格的大小约为50 × 50 µm marked by the LMD 系统 [2].

活江苏体彩研究中的LMD –一种方法"故意破坏"

徕卡 LMD 在活江苏体彩领域对江苏体彩结构如中心体,微管和膜的故意机械破坏也特别有用。例如,据称,激光可以对江苏体彩膜进行穿孔,以渗透先前被膜完全阻断的物质。 莫妮卡·戈塔(Monica Gotta)教授 来自日内瓦大学遗传医学与发展系。最重要的是,可以在江苏体彩分裂过程中操纵江苏体彩的纺锤体设备(图 3).   

图3:野生型单江苏体彩胚胎中的有丝分裂纺锤体消融。一种 秀丽隐杆线虫 单江苏体彩胚胎表达 α-微管蛋白融合于 绿色荧光蛋白。有丝分裂纺锤体在激光消融之前(a)和激光消融之后(b)。消融后两个主轴极分开 [5].