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抽象

光片荧光显微镜:平地之外

光片荧光显微镜(LISH-M)是一种真正的荧光光学切片技术,最早由Heinrich Siedentopf在1902年以Ultramicroscopy的名称进行描述。光学片显微镜利用光平面对样品进行光学切片。这允许在透明组​​织和整个生物体内进行深层成像。由于组织仅暴露于薄薄的光平面,与宽视野荧光,共聚焦或多光子显微镜相比,光漂白和光毒性最小。另外,光片的使用大大减少了聚焦光,并改善了图像的信噪比。薄板荧光显微镜结合了宽视野方法(速度,灵活性和动态范围)与共焦布置(光学切片)的优点。

在过去的十年中,由不同实验室以不同的缩写形式构建了该技术的几种实现方式:OPFOS,SPIM,TSLIM,MISERB...。其中大多数共享正交设计,但是所使用的照明类型或附加组件有所不同。此外,光片显微镜需要三维(3D)先进的样品制备技术,以便从视觉上完全访问大多数生物样品,从单个酵母到正在生长的拟南芥。最后,光片荧光显微镜的多视图功能为用户提供了必须合并和融合的多个大型图像堆栈。这是一个重要的限制,因为大型数据集的图像处理(每个实验最多1Tb)是一个挑战,尤其是在需要融合时。

本书章节将为读者提供关于这种新兴技术的全面介绍。我们还将讨论3D样品制备和图像处理的两个相关问题。最后,我们提供有关词汇表显微镜的不同实现和各种模型的词汇表和有用文献的列表。

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Gutiérrez-HerediaL,Flood PM和Reynaud EG:
光片荧光显微镜:平地之外

显微镜对科学和技术进步的最新贡献(Méndez-VilasA,编辑),第838-47页,Formatex(2012年)