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马赛克图像

集合在一起的东西

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共聚焦激光扫描显微镜被广泛用于创建细胞,亚细胞结构甚至单个分子的高分辨率3D图像。尽管如此,越来越多的科学家将他们的生物研究重点从单细胞研究扩展到整个器官和生物体,以分析整个动物内部的复杂相互作用。一种以3D观察大型标本的解决方案是使用基于宏观变焦光学的共焦大型成像系统,但在某些情况下,只能使用显微镜系统才能达到所需的分辨率。但是,这里记录的视场相对较小,尤其是在使用更高的放大倍数达到亚细胞分辨率时:e。 G。 63x物镜的记录面积在200 x 200 µm范围内,因此无法完全观察和分析较大的样品。

较大的标本,尽管扫描区域较小

解决此问题的方法-较大的样本,但高分辨率下的扫描区域较小镶嵌功能 可用于组合单个图像以形成样本的一个大的超图像。拼接超级图像的前提是平铺扫描,该扫描会记录样本中定义数量的相邻单幅图像("tiles"). The sample is generally moved using motorized stages with high precision. To perfectly match 的 瓷砖 a small percentage (2–10 %)必须在单个图像之间重叠像素。大多数应用程序软件都提供有用的功能,其中仅必须定义样本相对角上的两个参考点,或者自动检测样本区域。依次计算出覆盖标本的扫描区域的数量和位置,包括预定的重叠区域。在扫描过程之后,将使用专门设计的拼接算法组装镶嵌图像。 

解决此问题的方法-较大的样本,但高分辨率下的扫描区域较小 -镶嵌功能 可用于组合单个图像以形成样本的一个大的超图像。拼接超级图像的前提是平铺扫描,该扫描会记录样本中定义数量的相邻单幅图像(“tiles”). The sample is generally moved using motorized stages with high precision. To perfectly match 的 瓷砖 a small percentage (2-10%)必须在单个图像之间重叠像素。大多数应用程序软件都提供有用的功能,其中仅必须定义样本相对角上的两个参考点,或者自动检测样本区域。依次计算出覆盖标本的扫描区域的数量和位置,包括预定的重叠区域。在扫描过程之后,将使用专门设计的拼接算法组装镶嵌图像。 

3D mosaic images

镶嵌功能不仅限于xy图像,还可以用于创建大型3D图像。因此,平铺扫描不仅必须在一个焦平面上执行,而且还必须在不同的z平面上执行,以创建相邻图像堆栈的3D马赛克。然而,基本前提是焦平面之间的同步z距离。

Time lapse movies

由于镶嵌扫描可以循环重复进行,因此该功能可用于创建活体样本的延时电影。唯一的限制将是样品变化的速度,因为瓷砖扫描需要时间,尤其是在三个维度上。

多位置功能

另外,可以在平台的不同位置执行镶嵌功能。这样可以在一个实验设置中记录多个样本(例如,载玻片上的不同切片或多孔板中的多个样本)。由于不同样本的记录条件会有所不同,因此所使用的系统应提供为每个位置甚至每个扫描图块定义不同扫描设置的可能性。