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胚胎斑马鱼Mauthner细胞的膜片钳记录

Mauthner细胞(M细胞)是位于硬骨鱼后脑的大型网状棘突神经元。它们是参与特定行为的关键神经元,这种行为被称为C起始或逃逸反应,当有机体感知到威胁时就会发生。 M细胞已在成年金鱼中进行了广泛的研究,已显示其可接收多种兴奋,抑制和神经调节信号。为了研究脊椎动物制剂中突触发育的各个方面,我们一直在检查斑马鱼胚胎中的M细胞活性。在1990年代后期,Ali及其同事开发了一种从斑马鱼胚胎中的M细胞记录膜片钳的制剂,其中CNS在很大程度上是完整的。当时的目的是记录后脑神经元,脊髓神经元和躯干骨骼肌的突触活性,同时在完整的脑脊髓制剂中维持功能性突触连接。今天,我们的实验室仍在使用这种制剂。为了检查潜在的发育突触可塑性的机制,我们记录了来自发展中的M细胞的兴奋性(AMPA和NMDA介导的)和抑制性(GABA和甘氨酸)突触电流。重要的是,这种独特的制备方法使我们可以从制备方法到制备方法返回同一细胞(M细胞),以仔细检查胚胎生物中的突触可塑性和神经发育。该制剂提供的好处包括:1)与M细胞完整的功能性突触连接; 2)相对便宜的制剂; 3)大量容易获得的胚胎; 4)返回相同细胞类型(即M-细胞)在每种制剂中,因此可以检查鱼与鱼之间单个细胞水平的突触发育,以及5)由于胚胎的透明性,对整个制剂进行成像。


图片:Roy B,Ali DW:来自胚胎斑马鱼Mauthner细胞的膜片钳记录,图 2

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Roy B和Ali DW:
胚胎斑马鱼Mauthner细胞的膜片钳记录

J.Vis。经验79:e50551(2013); doi:10.3791 / 50551