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电影的相量分析(荧光寿命成像显微镜)

用于分析荧光寿命的相量分析方法不需要任何拟合。相量 电影 (荧光寿命成像显微镜)提供了寿命分布的二维图形视图。该图形视图使任何观察者能够区分和分离一个生命周期内的不同寿命种群。 电影 图像迅速。相量的解释 电影 发行很简单。因为每个物种都有特定的相量,所以可以在单个像素内解析多个分子物种。

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相量图如何生成?

当使用时间分辨单光子计数(TCSPC)系统获取数据时,相量 电影 分布是从傅里叶变换(Digman 。,2008)。图像中的每个像素对应于相量图中的一个点。

规则:相量的代数

相量方法中只有很少的规则,它们使寿命分布的解释变得简单。最重要的三个如下所示(E.Gratton,2018)。

1.单指数寿命位于万能圆线上。

2.多指数寿命位于通用圆内,是它们的单个指数寿命成分的线性组合。

3.对于多指数寿命(通过实验测量)的线性组合比率决定了组分的分数(f1 和f2)的两个单指数寿命(τ1 和τ2)。

使用相量的优势

相量 电影 是用于分子种类分离和分析的非常强大的分析工具 烦恼 分析,尤其是在供体具有多指数寿命的情况下,这是CFP [氰基荧光蛋白](Caiolfa 等。,2007)。此外,相量 电影 结合 STED,让您减少使用 STED 达到相同分辨率的能力(Lanzanò 等。,2015)。

参考和其他信息

  1. M.A. Digman,V.R. Caiolfa,M。Zamai,E。Gratton,荧光寿命成像分析的相量方法,Biophys。 J.(2008)卷。 94,ISS。 2,第L14–L16页
  2. V.R. Caiolfa,M。Zamai,G.Malengo,A.Andolfo,C.D。 Madsen,J。Sutin,M.A。Digman,E。Gratton,F。Blasi,N。Sidenius,GPI锚定的uPAR的二聚体-二聚体动力学和分布,由细胞表面蛋白组装体,J。Cell Biol。提供。 (2007)卷。 179,ISS。 5,第1067-1082页
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  7. L. Wang,B. Chen,W. Yan,Z.Yang,X.Peng,Lin D,Weng,T.Ye,Qu。情节方法。纳米级。 (2018),第1期。 10个问题34,第16252-16260页
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  9. E. Gratton,相量方法:在FRET分析和组织自发荧光中的应用,13 2018年LFD研讨会,2018年10月22日至26日,美国加州大学欧文分校荧光动力学(LFD)实验室
  10. E. Gratton,相量方法:在FRET分析和组织自发荧光中的应用,6 欧洲高级荧光成像和动力学讲习班,2018年12月10日至14日,FAB实验室,德国慕尼黑路德维希-马克西米利安斯大学