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讲解

STED样品制备指南

本指南旨在帮助用户优化受激发射耗竭的样品制备(STED)显微镜检查,特别是在使用 TCS SP8 STED徕卡微系统的3倍纳米镜。它概述了用于单色的荧光标记 STED 成像和性能排名。双色和三色荧光标签组合 STED 建议在检测过程中尽量减少串扰的成像。讨论了有关免疫荧光标记的注意事项以及获得标本中感兴趣结构的具有高信噪比(S / N)的高质量图像的详细协议。审查了样品安装和能够实现最佳成像,最小化由于安装介质而引起的像差和自发荧光的基板的重要细节。最后,对于 STED 在活细胞成像中,提到了最合适的荧光标记,荧光蛋白(FPs)和有机荧光团均能提供最佳性能。

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